ENZO熱銷產(chǎn)品——FLUOR DE LYS® HDAC fluorometric activity assay kit組蛋白去乙酰化酶熒光活性檢測(cè)試劑盒

目前，組蛋白去乙酰化酶抑制劑已經(jīng)顯示出其作為抗腫瘤藥物的前景，這也自然激發(fā)了研究者們對(duì)于篩選HDAC（Histone deacetylase，組蛋白去乙酰化酶）抑制化合物的興趣。Enzo的FLUOR DE LYS®HDAC熒光活性檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)：BML-AK500-0001）是一種靈敏、便捷的組蛋白去乙酰化酶檢測(cè)試劑盒，可替代使用傳統(tǒng)的放射性標(biāo)記的乙酰化組蛋白和肽/HPLC法檢測(cè)組蛋白去乙酰化酶的方案。

FLUOR DE LYS®去乙酰化酶檢測(cè)平臺(tái)是Enzo的升級(jí)酶活性檢測(cè)系列產(chǎn)品的基礎(chǔ)，其中的產(chǎn)品就包括用于篩選HDAC（組蛋白去乙酰化酶）活性調(diào)節(jié)劑和Sirtuin（長(zhǎng)壽蛋白，一種去乙酰化酶）活性調(diào)節(jié)劑的試劑盒。Enzo還可提供基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）的試劑盒，用以檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）和天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶（Caspase）的活性，以及提供基于磷酸特異性抗體的激酶檢測(cè)試劑盒。

這些檢測(cè)證明了Enzo在組裝小肽、合成活性重組蛋白、熒光標(biāo)記和檢測(cè)技術(shù)，以及抗體開(kāi)發(fā)等多方面協(xié)同的能力，也保障了Enzo能夠生產(chǎn)出功能強(qiáng)大且重復(fù)性好的檢測(cè)試劑盒。

Enzo的酶活性檢測(cè)試劑盒均具有以下特點(diǎn)：

高品質(zhì)：高活性、高純度的重組酶，可呈現(xiàn)高質(zhì)量的底物結(jié)合效果

靈活性：批量酶和底物可用于篩選后研究

強(qiáng)創(chuàng)新：多種readout 格式的專-利底物/顯影劑化學(xué)物質(zhì)

作用機(jī)制：

FLUOR DE LYS® HDAC fluorometric activity assay kit基于Enzo特-有的 FLUOR DE LYS®（熒光法組蛋白去乙酰化酶-賴氨酸）底物和顯影劑組合，只需2步簡(jiǎn)單的混合步驟，即可在同一個(gè)96 孔板上進(jìn)行檢測(cè)。首先，將含有乙酰化賴氨酸側(cè)鏈的FLUOR DE LYS®底物與含有HDAC活性的樣品（HeLa核或其他提取物、純化酶、珠結(jié)合免疫復(fù)合物等）一起孵育。底物的去乙酰化會(huì)使底物增敏，所以在第二步中，將其與FLUOR DE LYS®顯影劑混合后會(huì)產(chǎn)生熒光團(tuán)。

該檢測(cè)方法目前已經(jīng)成功用于所有已知的I類HDAC——HDAC1、HDAC2、HDAC3和HDAC8（見(jiàn)產(chǎn)品數(shù)據(jù)表）和II 類HDAC 4-7、9和10，以及人類Sir2同源物和SIRT1（見(jiàn)產(chǎn)品數(shù)據(jù)表）的制備。Enzo Life Sciences的研究表明，F(xiàn)LUOR DE LYS®底物具有細(xì)胞滲透性，并可在原位被細(xì)胞HDAC去乙酰化。脫乙酰化的底物在細(xì)胞內(nèi)積聚后，可通過(guò)向細(xì)胞裂解液中加入FLUOR DE LYS®顯影劑進(jìn)行定量測(cè)定。

Figure 1. HDAC熒光活性檢測(cè)的反應(yīng)方案。底物去乙酰化使其對(duì)顯影劑敏感，從而產(chǎn)生熒光團(tuán)（symbol）。熒光團(tuán)可被360 nm的光激發(fā)，并發(fā)射出460 nm的光，發(fā)射光在熒光平板閱讀器上可被檢測(cè)到。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

使用提供的核提取物，有助于檢測(cè)裂解物、免疫沉淀物以及篩選抑制劑；

含有HeLa核提取物，作為HDAC 1和2的豐富來(lái)源，可用作陽(yáng)性對(duì)照，也可用作篩選HDAC活性的來(lái)源；

與I & IIb類HDAC和Sirtuin兼容（添加NAD+）；

無(wú)放射性，沒(méi)有提取步驟；

所提供的試劑足夠分析100-200次。

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品引用文獻(xiàn)：

The activation of histone deacetylases 4 prevented endothelial dysfunction: A crucial mechanism of HuangqiGuizhiWuwu Decoction in improving microcirculation dysfunction in diabetes: M. Chen, et al.; J. Ethnopharmacol. 307, 116240 (2023), Abstract;

Four New Anthraquinones with Histone Deacetylase Inhibitory Activity from Ventilago denticulata Roots: N. Hangsamai, et al.; Molecules 27, 1088 (2022), Abstract;

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